一种检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素A的双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域。本发明应用购于北京军事医学院的重组金黄色葡萄球菌肠毒素A（SEA）免疫8周龄的BALB/c小鼠，经过正常的免疫、细胞融合、筛选后得到10株SEA单克隆抗体，10株抗体分别标记辣根过氧化物酶（HRP）并进行两两配对。最后选定以JN2011-01、JN2011-02分别为包被抗体和酶标抗体，以SEA为标准品建立了SEA的夹心ELISA分析方法，LOD为0.23ng/mL，线性范围为0.5-8ng/mL。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可以大量制备的单克隆抗体，建立的双抗体夹心法灵敏度高，成本低，与金黄色葡萄球菌肠毒素B、C、D、E无交叉反应，为食品中SEA的检测提供了快速高效的分析手段。